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酪氨酸酶(tyr)是一種細(xì)胞質(zhì)黑色素細(xì)胞分化蛋白,通過將酪氨酸氧化為醌,在黑色素生物合成中起重要作用。下面三溴化磷廠家將介紹三溴化磷在制備酪氨酸酶中的應(yīng)用。
酪氨酸酶活性的傳統(tǒng)檢測(cè)方法包括比色法、電化學(xué)法、光化學(xué)法和拉曼光譜法。然而,目前用于酪氨酸活性檢測(cè)的化學(xué)傳感器存在斯托克斯位移小、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn),因此,開發(fā)能夠克服上述缺點(diǎn)的新型化學(xué)傳感器的任務(wù)尤為緊迫。
三溴化磷批發(fā)廠家為了提供一種能夠以高選擇性和靈敏度檢測(cè)酪氨酸酶活性的近紅外化學(xué)傳感器分子,將環(huán)己酮添加到三溴化磷、二甲基甲酰胺和二氯甲烷的混合溶液(溶液)中。溫度為0°C),然后加熱反應(yīng)。反應(yīng)中摩爾比為1:1.1,二甲基甲酰胺與二氯甲烷的體積比為0.224:
將4.48ml二甲基甲酰胺和20ml二氯甲烷混合后,冷卻至0℃,在劇烈攪拌下滴加到體系中,30分鐘后將4.9ml環(huán)己酮加入到體系中。將該體系在室溫下攪拌12小時(shí),然后倒入30ml純水中并用碳酸氫鈉中和。水相用60ml二氯甲烷萃取3次。合并有機(jī)相,用無水硫酸鈉干燥,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑,得到黃色油狀固體化合物。
該化合物不經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)。將化合物1 (0.204 g, 1.08 mmol)溶解在6 ml二甲基甲酰胺和4-甲氧基水楊醛(0.137 g, 0.9 mmol)中。在劇烈攪拌下,將碳酸銫(0.88 g,2.7 mmol)添加到系統(tǒng)中。將體系在室溫下攪拌24小時(shí),然后向體系中加入60ml二氯甲烷,用水沖洗3次(每次20ml),合并有機(jī)相,用無水硫酸鈉干燥,有機(jī)溶劑用通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去以獲得固體。使用二氯甲烷作為洗脫劑通過柱色譜法獲得亮黃色化合物。
將甲基喹啉(0.48 g,3.35 mmol)和碘乙烷(0.78 g,5 mmol)溶解在25 ml乙腈中,加熱至80℃并回流12小時(shí)。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑后獲得的固體用乙醚進(jìn)行超聲處理。濾出的產(chǎn)物用乙醚沖洗3次,真空干燥,得到化合物3,為綠色固體(88%收率),無需進(jìn)一步處理,直接用于下一步反應(yīng)。三溴化磷的添加量與環(huán)己酮有關(guān),兩者的添加量有一定的比例關(guān)系。
酪氨酸酶可應(yīng)用于體內(nèi)酪氨酸酶的熒光成像,在提高體內(nèi)酪氨酸酶產(chǎn)生機(jī)制的研究水平和促進(jìn)酪氨酸酶相關(guān)研究方面具有良好的應(yīng)用前景。
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